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作业2
微生物检测采样的基本注意事项
- 采样器具无菌：采样容器、工具必须经过灭菌处理，包装完好，防止器具本身携带杂菌造成样品污染；避免用手触碰容器内壁、瓶口及采样部位。
- 避免样品二次污染：采样操作要在洁净环境下进行；打开无菌容器后尽量缩短敞口时间，取样后立即盖紧，不要接触非无菌物体。
- 采样具有代表性：按照规范布点、确定采样位置与采样量，不能只取局部，保证所采集样品能够真实反映被检测对象整体微生物状况。
- 控制采样时间与温度：微生物样品采集后要尽快送检；水样等样品一般 4℃冷藏保存，不可冷冻，抑制微生物过度繁殖或死亡，防止菌群结构发生改变。
- 做好样品标识：采样容器上清晰标注样品名称、采样地点、采样时间、采样人、样品编号等信息，做好采样原始记录。
- 防止交叉污染：不同样品之间更换采样工具；不同类别样品分开存放，避免样品之间互相污染。
- 严格遵循采样顺序：优先采集微生物样品，避免其他理化检测操作对样品造成干扰；采样过程避免阳光长时间直射样品。
- 安全防护：采集疑似含有致病微生物的样品时，做好个人防护，防止人员感染，采样废弃物按要求处置。
作业1
列表阐述细菌、酵母菌、霉菌菌落形态的特点。
| 微生物类别 | 大小 | 形态外观 | 颜色 | 质地 | 边缘 | 隆起度 | 其他特征 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 细菌 | 较小，直径一般 1‑2mm | 圆形或不规则形 | 灰白色、乳白色，少数黄、红等颜色 | 光滑、湿润、黏稠，易挑起 | 整齐或不整齐 | 扁平或微隆起 | 大多不透明；菌落比较薄 |
| 酵母菌 | 中等，比细菌大，直径一般 2‑5mm | 多为圆形 | 乳白色、奶油色 | 湿润、黏稠，像奶油状，容易挑起 | 多数整齐 | 隆起、较厚 | 不透明；一般无绒毛 |
| 霉菌 | 大，可蔓延扩展，无固定直径 | 疏松绒毛状、絮状、蜘蛛网状 | 多样：绿、黑、黄、橙、棕等（孢子颜色） | 干燥疏松，不易挑起 | 不整齐，呈放射状 | 隆起，厚，向外蔓延 | 菌丝肉眼可见；有明显孢子色彩sd |
作业3
列举微生物检测实验室常用的设备
2. 培养设备：恒温培养箱、霉菌培养箱、恒温水浴锅；
3. 前处理设备：电子天平、pH 计、均质器、移液器、离心机；
4. 观察计数：生物显微镜、菌落计数器；
5. 储存设备：冷藏冰箱、低温冰柜。
作业4
简述革兰氏染色过程
涂片：取洁净载玻片，滴一小滴无菌水，挑取少量细菌培养物，在水滴中均匀涂开，做成薄菌膜。
干燥固定：自然晾干，将载玻片通过酒精灯火焰 2‑3 次进行热固定，使菌体牢固附着在玻片上。
初染：滴加结晶紫染液，染色 1 分钟，水洗。细菌全部被染成紫色。
媒染：滴加碘液，媒染 1 分钟，水洗。生成结晶紫‑碘复合物，增强染料与细胞结合。
脱色：滴加95% 乙醇，轻轻晃动玻片脱色约 30 秒，立即水洗。
革兰氏阳性菌：细胞壁肽聚糖厚，复合物保留，仍为紫色； 革兰氏阴性菌：脂类外膜被溶解，染料被洗脱，菌体变为无色。
复染：滴加番红（沙黄）染液，染色 1 分钟，水洗。阴性菌被染成红色，阳性菌保持紫色。
镜检：晾干后，置于显微镜油镜下观察。
作业5
简述细菌总数及大肠菌群的含义及卫生学意义
1. 细菌总数
含义：指在一定条件下（37℃、营养琼脂培养基），每克或每毫升样品中所含的细菌菌落总数，只反映可培养细菌的数量，不区分细菌种类。
卫生学意义： ① 反映样品受微生物污染的总体程度； ② 用于评价生产、加工、储存过程的卫生状况； ③ 细菌总数超标，说明卫生条件差，腐败变质风险升高；但不能直接判定是否存在致病菌。
2. 大肠菌群
含义：一群在 37℃条件下能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，主要来自人和温血动物的肠道，包含大肠杆菌等。
卫生学意义： ① 作为粪便污染指示菌。样品检出大肠菌群，提示受到粪便污染； ② 间接指示肠道致病菌（沙门氏菌、志贺菌等）存在的可能性； ③ 用来评价食品、水体等样品卫生质量，判断生产过程的粪便污染风险。
终考任务
1.
以下哪种划线方式通常用于检测过程中微生物的分离纯化？（ ）
单选题 (2 分)
A.
B.
C.
D.
2.
微生物检测过程中，制备的培养基是否符合使用标准，需进行的质量检验基本项目包括（ ）。
单选题 (2 分)
A.
无菌试验和效果试验
B.
培养基的pH
C.
培养基的颜色
D.
培养基外观
3.
玻璃器皿可采用湿热灭菌和干热法灭菌，下面做法不正确的是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
干热灭菌时，开通电源和箱顶通气口，至100℃时关上通气口
B.
在140～160℃温度下保温2～3h
C.
灭菌器皿放在恒温箱中排列整齐密实
D.
切断电源冷却至60℃时取出灭菌物品
4.
使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时，下面操作不正确的是( )。
单选题 (2 分)
A.
放入的物品应留有蒸汽流通的空间
B.
器具与乳糖发酵管分开灭菌
C.
密闭容器，打开电源开关，加热至温度为121℃
D.
灭菌结束，待自然降到室温后开盖
5.
无菌采样时操作人员手和容器消毒后，下面操作不正确的是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
固体样品用灭菌勺取样装入容器
B.
采样容器在火焰下消毒瓶口加盖封口
C.
液体样品瓶口消毒后开盖直接倒入取样瓶中
D.
在酒精灯火焰下封口
6.
在实验室不慎将酒精灯打翻，酒精在桌上燃烧过起来，正确有效的灭火方法是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
用嘴吹
B.
用抹布抽打
C.
用砂土掩盖
D.
浇水
7.
带菌吸量管的处理应当是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
酒精浸泡消毒，清水冲净
B.
先在3%来苏尔或5%石炭酸溶液内浸泡数小时或过夜，高压蒸汽灭菌后，用自来水及蒸馏水冲净
C.
用热水和肥皂水刷洗
D.
自来水直接冲洗
8.
菌落总数测定过程中应将培养物置于（ ）培养。
单选题 (2 分)
A.
25℃
B.
28 ℃
C.
36±1℃
D.
45℃
9.
EMB培养基常用来鉴别大肠菌群，其原因是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
大肠菌群的代谢产物与伊红-美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽
B.
大肠菌群能使培养基改变颜色
C.
大肠菌群能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活
D.
大肠菌群在该培养基中形成特定的菌落形状
10.
以下各组染料中，不可以作为细菌芽孢染色的是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
结晶紫和碱性美蓝
B.
孔雀石绿和沙黄
C.
碱性美蓝和番红
D.
碱性美蓝和石炭酸复红
11.
在测定菌落总数时，首先将食品样品作成（ ）倍递增稀释液。
单选题 (2 分)
A.
1∶5
B.
1∶10
C.
1∶15
D.
1∶20
12.
酵母菌测定结果，其单位表示方法为（ ）。
单选题 (2 分)
A.
CFU/kg(L)
B.
个/10g(ml)
C.
CFU/g(ml)
D.
个/100g(ml)
13.
以下培养基中不需要灭菌的是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
亚硫酸铋琼脂
B.
EMB
C.
PDA
D.
乳糖胆盐培养基
14.
剪刀、镊子、接种针，使用前后都应当采用（ ）方式灭菌。
单选题 (2 分)
A.
酒精灯火焰灼烧
B.
高压蒸汽
C.
烘箱消毒
D.
酒精浸泡
15.
糖(醇)类发酵试验结果观察和记录正确的是（ ）。
单选题 (2 分)
A.
产酸不产气，阳性，以“+”表示
B.
不产酸产气，阳性，以“+”表示
C.
产酸不产气，阴性，以“-”表示
D.
不产酸产气，阴性，以“+”表示
16.
测定菌落总数时，若菌落数在100以下则以实际数报告。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
17.
微生物检验采样后，非冷冻食品不需要低温冷藏保存。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
18.
在微生物的检验采样中，可以根据需要加入防腐剂，固定剂等物质。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
19.
革兰氏染色中，如若脱色过度，阳性菌可能被误染成阴性菌。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
20.
紫外线的穿透能力很弱，普通玻璃、尘埃、水蒸气等均可以阻拦紫外线，故紫外线只可用于包装等表层杀菌。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
21.
严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应视情况停止或继续使用。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
22.
培养基的营养物质包括氮源、碳源、无机盐。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
23.
检验员无权拒绝领导要求更改原始数据。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
24.
凡已能从药品、瓶口（外盖内侧及瓶口周围）外观看出长螨、发霉、虫蛀以及变质的药品，可直接判为不合格品，无需再抽样检验。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
25.
检验员应使用已校验的计量器具，当发现计量器具已损坏或对准确度、功能有怀疑时，应立即停止使用。
判断题 (2 分)
A.
正确
B.
错误
26.
同等温度下，干热灭菌法和湿热灭菌法相比较， 1 的效果较好。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
27.
菌检室在检验前打开紫外灯消毒 1 min。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
28.
抽样量一般应为检验用量的 1 倍。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
29.
抽样时如发现有异常或可疑的样品，应抽选 1
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
30.
用于样品表面消毒的酒精浓度为 1 。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
31.
对微生物进行生化特性的研究时最好选择处于 1 的微生物细胞。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
32.
常用的物理防霉方式包括干燥防霉、 1 和气调防霉。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
33.
防止微生物进入人体组织和其他无菌范围的操作技术是 1 。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
34.
高温杀菌的机理是细菌的 1 变性凝固，从而导致细菌死亡。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
35.
供试品一般按批号抽样，采用 1 方法抽样。
填空题 (2 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)
36.
列举微生物检测采样的基本注意事项。
简答题 (7.5 分)
37.
菌落总数的含义是什么？其卫生学意义是什么？
简答题 (7.5 分)
38.
微生物检验前要做哪些基本的准备工作？
简答题 (7.5 分)
39.
简单描绘菌落总数检验的程序。
简答题 (7.5 分)
